人胚肺二倍體細胞  2BS細胞株

【目的】
掌握LD50測定方法及計算過程。
【原理】將一定濃度和一定體積的藥物，按一定比例灌胃給予小鼠，觀察7日，記錄不同劑量小鼠的死亡情況，計算半數致死量，以確定藥物急性毒性。
【器材】 鼠籠、燒杯、1ml注射器等。
【藥品】 普魯卡因溶液（5個劑量）
【動物】 小鼠
【方法】
1.預試驗 模實驗劑量范圍，找出引起0～100%的估計致死量。
2.正式試驗
（1）取小鼠50只，體重20±2g，♀♂各半，隨機分為5組，10只/組。
（2）劑量 按等比級數增減，相鄰兩劑量比值1:0.6～0.9，設4～5個劑量組。
（3）給藥 普魯卡因溶液，ip。5個劑量組。
（4）統計 按改良寇氏法公式進行計算。
LD50=lg-1[Xm-i（∑P-0.5）] (公式1)
Xm：zui大劑量組劑量對數值
i：相鄰兩組劑量高劑量與低劑量之比的對數(相鄰兩組對數劑量的差值)
P：各組動物死亡率，用小數表示（如果死亡率為80%應寫成0.80）
∑P：各組動物死亡率之總和
n：每組動物數
Sx50= i×  (公式2)
Sx50：logLD50的標準誤
X50=logLD50
LD50的95%可信限=log-1（X50±1.96Sx50） (公式3)
LD50的平均可信限=LD50±(LD50的95%可信限的高限-低限)/2 (公式4)
【結果】 填入表11。
表11 各組小鼠用藥、死亡情況及有關計算
 
組別 動物數 劑量 對數劑量 死亡率 P 2 其他數據
(n) (mg/kg) （X） （P）
 

細胞庫目錄表：

人胚肺成纖維細胞MRC-5  
人胚肺成纖維細胞CCC-HPF-1  
人胚胎氣管組織來源細胞CCC-HBE-2  
人胚胎肺成纖維細胞WI-38  
SV-40Z轉化肺成纖維細胞WI38/VA13  
人胚肺二倍體細胞2BS  
人胚肺二倍體細胞KMB-17  
人肺細胞HLF-a  
人小細胞肺癌細胞DMS 153  
人胚肺細胞 VA13細胞WI-38 VA13亞系 2RA  
人胚肺二倍體細胞HEL-1  
人胚肺細胞系KuMA  
人肺轉化細胞系AE1201    
人肺鱗癌細胞NCI-H226  
人胚肺二倍體細胞HEL-2  
人支氣管上皮樣細胞BEAS-2B  
人胚肺轉化細胞SL-1  
人肺腺癌細胞Calu-3  
人小細胞肺癌細胞NCI-H209  
人低分化肺腺癌細胞GLC-82  
人小細胞肺癌細胞NCI-H446  
人非小細胞肺腺癌細胞NCI-H157  
人肺鱗癌細胞NCI-H520  
人肺巨細胞癌高轉移細胞株PG-BE1  
人肺巨細胞癌低轉移細胞株PG-LH7  
人肺癌細胞A-427  
人低分化肺腺癌細胞SK-LU-1  
人肺支氣管癌細胞NCI-H1650  
人非小細胞肺腺癌細胞NCI-H1975  
人非小細胞肺腺癌細胞NCI-H2087  
人小細胞肺癌細胞NCI-H2227  
人非小細胞肺癌細胞NCI-H23  
人肺腺鱗癌細胞NCI-H596  
人非小細胞肺癌細胞NCI-H838  
人肺鱗癌細胞LTEP-s  
人小細胞肺癌細胞LTEP-sm  
人肺鱗癌瘤株LTEP-s  
人肺鱗癌細胞NCI-H1703  
人肺鱗癌細胞NCI-H2170  
人非小細胞肺癌細胞NCI-H524  
人肺腺癌細胞SPC-A1  
人肺癌細胞A549  
人非小細胞肺癌細胞H125  

【注意】
1、預試驗要摸準藥物引起0和100%死亡率劑量的所在范圍。
2、正式試驗時各劑量按等比級數分組，應避免zui大劑量組的死亡小于80%，zui小劑量組死亡率大于20%，否則改用其他方法計算。
3、室溫：20℃為宜。
4、認真觀察中毒癥狀情況。
【思考題】
1、半數致死量（LD50）測定的目的意義如何？
2、半數致死量（LD50）常用的計算方法有哪些？