1 轉染前一天將293T細胞鋪于10cm板，當細胞密度達到80％左右即可進行PEI轉染。
2將下列DNA加入一個已裝有480ul 1* HBS( PH 7.4)滅菌管混勻
三質粒系統：
12ug vector
6ug VSVG
9ug PHR
四質粒系統：
12ug vector
6ug VSVG
6ug RSV-REV
6ug pMDL
3. 將10* PEI 劇烈振蕩后加入到360ul 1* HBS( PH 7.4)滅菌管混勻
4. 將混勻的PEI加入到裝有DNA的滅菌管中，用槍頭吹吸15次混勻，室溫30分鐘
5．吸去待轉染細胞的培養液換成5ml無血清DMEM培養，待DNA靜置時間到達，將DNA混合液逐滴均勻加入到細胞培養皿中，用手輕搖混勻平皿
6．6-8小時后，將無血清DMEM移去，換成13ml 10％血清的正常DMEM于37培養包裝病毒
7．在隨后的三天，每天收集細胞上清于一個滅菌的50ml管中保存于4℃，隨后更換新鮮培養液
注：對于pBoBi和pll3.7來說，決定其滴度的關鍵因素就是包裝質粒時的轉染效率

8. 收集的細胞上清液經過0.45um一次性濾器過濾，除去細胞碎片
9．將35ml過濾的上清加入到一個高速離心管中，離心管用培養液平衡并用封口膜封口
10. 4℃，70000g離心2小時后，用移液管小心移去上清，加入1ml培養液并用移液管小心吹吸大概20下至沉淀溶解
11. 收集到的病毒根據所需量，在終濃度6-10ng/ul polybrene 存在下加入到70％左右目的細胞的6孔板中
注：收集的病毒也可液氮速凍后至于-80℃保存，凍存的濃縮病毒應該沒有滴度降低，
12. 6孔板于37℃2500rpm離心30分鐘后，置于37℃培養
13. 24小時后觀察細胞轉染效率和細胞狀態并換液
注：如果此時發現細胞大量死亡，可以考慮減少感染時間，或是降低polybrene濃度