人脂聯(lián)素Elisa試劑盒操作步驟
- 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2000pg/ml | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
1000pg/ml | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
500pg/ml | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
250pg/ml | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
125pg/ml | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
- 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
- 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
- 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
- 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
- 溫育：操作同3。
- 洗滌：操作同5。
- 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
- 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
- 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
人脂聯(lián)素Elisa試劑盒相關產(chǎn)品：
大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠*結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠戊糖素(Pentosidine)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠雌激素受體(ER)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠β-防御素(β-Defensins)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠多巴胺D1受體(D1R)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*(AcSDKP)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)試劑盒說明書，96T/48T
大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒說明書，96T/48T
人脂聯(lián)素Elisa試劑盒計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度
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