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抗體課堂：正確選擇同型對照，陽性對照
閱讀：4320 發(fā)布時(shí)間：2015-3-18同型對照的主要目的是確定一抗的結(jié)合是特異性的，而不是非特異性的Fc受體或與其他蛋白的相互作用。同型對照要與一抗的來源、Ig分型和標(biāo)記*一致。例如：一抗是FITC標(biāo)記，其抗體分型是小鼠的IgG1，則同型對照要選擇是FITC標(biāo)記的小鼠的IgG1。這里如同使用流式抗體一樣，同樣的不可離開說明書！
多抗的同型對照：
絕大部分的同型對照產(chǎn)品都是單克隆抗體，因此不適用于作為多克隆抗體的對照(因?yàn)槎嗫购卸喾NIgG的亞型)。
陽性對照的使用是一個(gè)實(shí)驗(yàn)中確定抗體及檢測系統(tǒng)是否正常工作的依據(jù)，也是確定待測標(biāo)本中是否存在待測蛋白的一個(gè)依據(jù)！尤其是檢測的標(biāo)本是不確定是否有待測蛋白表達(dá)時(shí)。因此當(dāng)實(shí)驗(yàn)沒有陽性結(jié)果出現(xiàn)時(shí)，的選擇是實(shí)驗(yàn)合適的陽性對照。
說明書上都有推薦的陽性對照。但是如果說明書上沒有推薦時(shí)，請參考以下條款：
看看說明書中是否有Abreviews。任何被其他客戶成功檢測的組織、細(xì)胞或者裂解物均可以作為合適的陽性對照！
根據(jù)說明書上的Swiss-Prot或Omnigene數(shù)據(jù)庫來查找。這些數(shù)據(jù)庫經(jīng)常會(huì)列出該蛋白表達(dá)的組織，這也可以作為合適的陽性對照！
查查該蛋白的GeneCards吧，這里通常會(huì)有蛋白在不同組織的表達(dá)水平。
對于不同的問題，不同的測試，相關(guān)性的不同的性能，拿流式抗體來說，在使用的過程中要特別謹(jǐn)說明書使用！