根據我司多年來Elisa試劑盒的操作經驗，我司特在新春佳節來臨之際，對Elisa試劑盒操作步驟建立表格版文檔，供大家詳細參考Elisa試劑盒的具體操作步驟。咨詢我司試劑產品，年末有特惠活動哦。
方法
步驟
間接法（測抗體）
雙抗體夾心法
（測抗原）
競爭法（測抗原）
抑制性測定法
1
包被抗原：用包被緩沖液稀釋抗原至zui適濃度（5～20μg/ml）各0.3ml加于微反應板每個凹孔中,4℃過夜或37℃水浴2～3小時,貯存冰箱
包被抗體：用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至zui適濃度（1～10μg /ml），每凹孔加0.3ml，4℃過夜，或37℃水浴3小時，貯存冰箱
包被特異性抗體：
同左
包被抗原：
同左
2
洗滌：移去包被液，凹孔用洗滌緩沖液（含0.05%吐溫-20）洗3次，每次5分鐘
同左
同左
同左
3
加被檢標本：每凹孔加入用含有0.05%吐溫-20的稀釋緩沖液稀釋的被檢血清各0.2ml，37℃，作用1～2小時
每凹孔加入0.2ml用稀釋緩沖液稀釋的含抗原的被檢標本，37℃作用1～2小時。
分2組,a組加酶標記抗原和被檢抗原混合液0.2ml，另一組只加酶標記抗原液0.2ml，37℃作用1～2小時。（混合液可作成不同稀釋度）。
a組加參考抗體和被檢抗原混合液0.2ml，另一組加參考抗體與等量稀釋劑0.2ml，37℃作用1～2小時。
4
洗滌：重復2
同左
洗滌：同左
洗滌
5
加入酶結合物：每凹孔加入稀釋緩沖液稀釋的酶結合物0.2ml 37℃作用1～2小時
加入0.2ml用稀釋緩沖液稀釋的酶標記特異性抗體溶液，37℃作用1～2小時或由預試實驗確定作用時間。
各加入0.2ml抗參考抗體的酶結合物37℃作用1～2小時
方法
步驟
間接法（測抗體）
雙抗體夾心法
（測抗原）
競爭法（測抗原）
抑制性測定法
6
洗滌：重復2
同左
洗滌
7
加入0.2ml底物溶液于每個凹孔,(O.P.D或O.T)，室溫作用30分鐘（另作一空白對照，0.4ml底物加0.1ml終止劑）。
同左
同左
同左
8
加終止劑：每凹孔加2M H2SO4或2M檸檬酸0.05ml。
同左
同左
同左
9
觀察記錄結果：目測或用酶標比色計測定（O.P.D用492nm）O.D值。
同左
用酶標比色計測定a、b兩組O.D值，并求出a、b、O.D值的差數
同左
