家兔皮膚來(lái)源細(xì)胞價(jià)格冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
細(xì)胞名稱(chēng) 家兔皮膚來(lái)源細(xì)胞價(jià)格
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于一只出生三天的雌性家兔的耳皮膚組織。由中科院昆明細(xì)胞庫(kù)于2014年建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR -
同工酶 無(wú)
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)
注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供的報(bào)價(jià),咨詢,稱(chēng)技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
Human Salusin Alpha ELISA Kit 人Salusin-αMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SCN2A SCN2A抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GPX4 *過(guò)氧化酶4抗體 規(guī)格 0.2ml
HSCCAg-2(uman Squamous Cell Carcinoma Antigen 2) ELISA Kit 人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2 96T
ODF3B 英文名稱(chēng): 外致密纖維蛋白3B抗體 0.2ml
BMP3 英文名稱(chēng): 骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體 0.1ml
Anti-SCN2A SCN2A抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CLU(Human clusterin) ELISA Kit 人凝聚素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PLCG 2/PLC gamma 2 磷酯酶Cγ2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HIAT1 海馬豐富基因轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
AT- III ELISA Kit 大鼠抗*Ⅲ抗體 96T
PLRP1 英文名稱(chēng): 胰脂肪酶相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
C2CD4D 英文名稱(chēng): C2CD4D蛋白抗體 0.2ml
Anti-PLCG 2/PLC gamma 2 磷酯酶Cγ2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-DCX/FITC 熒光素標(biāo)記雙皮質(zhì)素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-MAG-a/L-MAG /FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Calreticulin 鈣網(wǎng)蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Cx40 (Connexin-40) 間隙連接蛋白40(多肽) 0.5mg
HAPLN1 英文名稱(chēng): 透明質(zhì)酸及粘蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh SESN1/PA26 p53調(diào)控PA26核蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-MAG-a/L-MAG /FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-MYL2 (Ser19) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TrK A/FITC 熒光素標(biāo)記*激酶A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCB6 ATP結(jié)合蛋白家族6抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GLRA4 英文名稱(chēng): 甘酸受體α4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rab24 ras基因相關(guān)蛋白R(shí)ab24抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-TrK A/FITC 熒光素標(biāo)記*激酶A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml