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上海撫生實業有限公司
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閱讀:245發布時間:2018-3-19
IFN-Yelisa檢測試劑盒注意的這些檢測要點;
1)仔細閱讀說明書 確定試劑盒在有效期內,按說明書確定所有試劑齊全,以及所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等。
2)標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份,短期內無法實驗者,注意低溫保存。
3)按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑,選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體。
4)一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml,可利用標準的ELISA試劑盒操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
操作程序如下:
(1) 資料
① 包被液、洗刷液、保溫液、底物液、停止液;
② DVH包被抗原、酶標抗抗體、陰性及陽性DVH參閱血清;待檢鴨血清;
③ ELISA檢測儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。
(2) 方法過程
① 加抗原包被 → 4℃過夜,洗刷三次、拋干
② 加待檢血清 → 37℃ 2小時,洗刷三次、拋干
③ 加酶標抗體 → 37℃ 2小時,洗刷三次、拋干
④ 加底物液 → 37℃ 30分鐘,加停止液
⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值,并計算出P/N比值。
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