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技術(shù)文章

豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒說明書

閱讀:80          發(fā)布時間:2019-8-1

豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料:

英文名稱:Swine secretory immunoglobulin A (sIgA) ELISA kit

貨號:KS17862

規(guī)格:96T/48T

使用范圍:科研范圍內(nèi)使用

各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊… 
標(biāo)本齊全:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔yi液等… 
保存條件:2-8℃ 
實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。

豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標(biāo)儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

試劑準(zhǔn)備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒注意事項

1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

9. 不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:

KS10067 人*受體(TR)ELISA試劑盒

KS10068 小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒

KS10069 小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒

KS10070 人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒

KS10071 兔Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒

KS10072 人苯*(LPA)ELISA試劑盒

KS10073 雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒

KS10074 小鼠補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒

KS10075 人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒

KS18459 豬1-磷酸鞘氨醇(S1P)ELISA試劑盒

KS10077 小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒

KS10078 大鼠抗*(AT)ELISA試劑盒

KS17921 豬25羥基*3(25HVD3)ELISA試劑盒

KS10080 大鼠磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒

KS10081 人鳥苷酸交換因子(GEF)ELISA試劑盒

KS10082 人促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒

KS10083 兔抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒

KS10084 小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒

KS10085 大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒

KS10086 人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒

KS10087 小鼠褪黑素(MT)ELISA試劑盒

KS10088 大鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒

KS10089 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒

KS10090 人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒

KS10091 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA試劑盒

KS10092 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒

KS10093 *GFc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒

KS10094 人可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒

KS10095 人低分子量細(xì)胞角蛋白(CK-LMW)ELISA試劑盒

KS10096 人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒

KS10097 人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒

KS10098 人EB病毒IgG(EBvIgG)ELISA試劑盒

KS10099 人C多肽(CP)ELISA試劑盒

KS10100 小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒

KS10101 人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒

KS10102 小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒

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