HT115(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA (質(zhì)粒或連接產(chǎn)物) 并用手EP管底輕輕混勻 (避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.或LB培養(yǎng)基(S.O.C.營養(yǎng)豐富,可提高轉(zhuǎn)化效率)。
4. 37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘或30℃,225 rpm復(fù)蘇90分鐘。
(當(dāng)質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時(shí),30℃培養(yǎng)可降低錯(cuò)誤重組的概率,若轉(zhuǎn)化control pUC19計(jì)算轉(zhuǎn)化效率,則需37℃,225 rpm復(fù)蘇60分鐘)
5. 5000rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C. 或LB培養(yǎng)基上。
6. 將平板倒置放于37℃或30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
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HT115(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片注意事項(xiàng):
1. 感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,不可在冰中放置時(shí)間過長,長時(shí)間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量。
?購買客戶請先與我司細(xì)胞銷售人員核實(shí)訂購的HT115(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細(xì)胞說明書并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6
SLPI Others Human 人 SLPI 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
95-D細(xì)胞,高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,M2e細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK
心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHCMEC cDNA
INSR Others Human 人 Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Long Isoform ) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腎近曲小管上皮細(xì)胞裂解物HRPTEpiCL
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠淋巴瘤細(xì)胞(NK靶細(xì)胞);YAC-1
tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6 膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
HuH-7人肝癌細(xì)胞 Human
CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6
SLPI Others Human 人 SLPI 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
95-D細(xì)胞,高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,M2e細(xì)胞 正常大鼠腎細(xì)胞;NRK
心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHCMEC cDNA
INSR Others Human 人 Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Long Isoform ) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
60%/L錄化鈉蛋白胨肉湯50克RT
7440-46-2銫標(biāo)準(zhǔn)溶液Cesium
4-Formyl-2-metxylpxenylboronic acid pinacol ester 1073354-66-1
乙酰基二乙酯 Diethyl acetamidomalonate,≥98% 1068-90-2 25G 通用試劑
透析袋4000/Dialysis tubing 4000 φ16(扁寬44mm),截留分子量4000 1米 USA
鈉一水物shēng huà shì jì容量:1克
9002-88-4高密度聚Polyetxylene, High Density
磺基水楊酸shēng huà shì jì容量:2~8℃1克
D-半乳糖烯 D-Galactal,95% 21193-75-9 500MG 通用試劑
人參皂苷Rg1 Ginsenoside Rg1 (≥98%,HPLC) 22427-39-0 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
HT115(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片偶氮脒類引發(fā)劑V65shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克
693-02-71-己炔, 98+%1-Hexyne
5-(2-pyridinyl)-2-thiopxene 119082-98-3
1,3,5-三苯 1,3,5-Trichlorobenzene,99% 108-70-3 25G 表面活性劑
眎胨3號 Nc
HT115(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞100ul*50圖片細(xì)胞的種類:
*種:
是凍存產(chǎn)品,由液氮直接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不*這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的zui好方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進(jìn)口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。