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Biotin標簽蛋白檢測| HRP辣根過氧化物酶標記

閱讀:1159發布時間:2017-6-19

Biotin標簽蛋白檢測工具

親合素主要包括卵白親合素(Avidin,A)、鏈霉親合素(Streptavidin,SA)、卵黃親合素及類親合素等。后兩種因其特異性親合力低,研究不多,前兩種目前已深入研究并得到廣泛應用。其中鏈霉親合素(SA)是與親合素(A)有類似生物學特性的一種蛋白質。是由Streptomyces avidin菌在培養過程中分泌的一種蛋白質產物,SA也可通過基因工程手段生產。SA分子量為65000,由4條序列相同的肽鏈構成,每條SA肽鏈可以結合1個*分子。近年大量研究證實,*—親合素系統幾乎可與目前研究成功的各種標記物結合。在*-親和素系統中,借助所形成的親和素-*-酶復合物,追蹤*標記的抗原或抗體,通過酶催化底物顯色,可檢出相應的抗體或抗原。

產品名稱

應用類型

貨號

規格

HRP-Streptavidin

WB,IHC,ELISA

A21000

100ul/500ul

 

使用HRP直標鏈霉親和素產品,快速、特異性檢測*化蛋白質

 

鏈霉親和素, HRP辣根過氧化物酶標記

 

辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素(SA-HRP)由鏈霉親和素(Streptavidin, SA)和辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase)交聯所得,可用于*化的抗體、蛋白、組織、細胞、核酸等樣品的檢測,常作為信號放大器,提高檢測靈敏度。

 

鏈霉親和素(SA)為4個相同亞基形成的四聚體蛋白質,分子量約為60 kDa,可以高度特異性地與*(Biotin)結合,1個SA可以結合4個*。與雞蛋清來源的親和素(Avidin)相比,SA無糖基化、等電點為中性或略酸性,因此SA的非特異性結合比Avidin低很多,用于檢測時非特異性背景就很低。

 

辣根過氧化物酶(HRP)是一種含亞鐵血紅素的糖蛋白,分子量約為40 kDa,糖含量18%,顯棕色。能與底物孵育,產生一種著色、熒光或發光標記的分子衍生物,這種現象使之廣泛應用于分子生物學、生物化學、免疫學等領域的檢測。

 

下表為常規用途的推薦稀釋比例,實際試驗操作過程中可根據具體實驗情況適當調整HRP-SA的稀釋比例。以常規的Western bolt為例,每次檢測需要10 ml 1:2000的稀釋液,每次只需5 μl(5 μg)。

 

WB

ELISA

IHC/IC

1:500 - 1:5000

1:200 - 1:500

1:200 - 1:500

WB:Western Blot; IHC:Immunohistochemistry; IC:Immunocytochemistry

 

注意事項:

1)溶解后放置在冰浴上并盡量馬上使用;

2)若一次性用不完,請在使用前配制成母液并分裝成小規格(保證一次試驗的用量)保存在-65℃,避免反復凍融影響蛋白活性

3)避免使用強酸、強堿、強氧化劑、高濃度的有機溶劑等易引起蛋白質變性的試劑;

4)本產品于科研使用。 
 

 


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