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抗NADH脫氫酶亞單位1單抗雜交瘤細(xì)胞;LP-NADH-F11復(fù)蘇

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-02-10 10:22:07瀏覽次數(shù):298次

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產(chǎn)品簡介

抗NADH脫氫酶亞單位1單抗雜交瘤細(xì)胞;LP-NADH-F11復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

詳細(xì)介紹

抗NADH脫氫酶亞單位1單抗雜交瘤細(xì)胞;LP-NADH-F11復(fù)蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

細(xì)胞名稱  抗NADH脫氫酶亞單位1單抗雜交瘤細(xì)胞;LP-NADH-F11復(fù)蘇
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性    
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C30
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

產(chǎn)品名稱生長特性發(fā)貨地貨期
半貼壁生長上海3-5天

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
L-天冬氨酸    shēng huà shì jì    容量:    RT    5克
L-*甲酯鹽酸鹽    shēng huà shì jì    容量:        1公斤
L-蘇氨醇    shēng huà shì jì    容量:    RT    25克
L-*甲酯鹽酸鹽    shēng huà shì jì    容量:        1公斤
L-鼠李糖    shēng huà shì jì    容量:        500克
L-叔*    shēng huà shì jì    容量:    RT    5克
L-腎上腺素    shēng huà shì jì    容量:        25克
L-山梨糖    shēng huà shì jì    容量:    RT    5克
L-*甲酯鹽酸鹽    shēng huà shì jì    容量:    RT,避光    25克
L-乳酸鈉    shēng huà shì jì    容量:        500克
L-乳酸鉀    shēng huà shì jì    容量:    2~8℃    5克
L-乳酸    shēng huà shì jì    容量:        25克兔血小板因4(PF-4/CXCL4)免疫試劑盒    Rabbit Plaet Factor 4,PF-4 ELISA Kit
兔透明質(zhì)酸酶(HAase)免疫試劑盒    Rabbit Hyaluronidase,HAase ELISA Kit
兔透明質(zhì)酸(HA)免疫試劑盒    Rabbit Hyaluronic acid,HA ELISA Kit
兔肽聚糖(PG)免疫試劑盒    Rabbit peptidoglycan,PG ELISA Kit
兔髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒    Rabbit myelin basic protein,MBP ELISA Kit
兔髓過氧化物酶(MPO)免疫試劑盒    Rabbit Myeloperoxidase,MPO ELISA kit
兔瘦素(LEP)免疫試劑盒    Rabbit Leptin,LEP ELISA Kit
兔*結(jié)合蛋白4(RBP-4)免疫試劑盒    Rabbit Retinol binding protein 4,RBP-4 ELISA Kit
兔生長激素釋放多肽(GHRP)免疫試劑盒    Rabbit Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit

 

 

 


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