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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司


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小鼠雜交瘤細(xì)胞;IE6-A2特性

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

小鼠雜交瘤細(xì)胞;IE6-A2特性現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明,歡迎前來(lái)選購(gòu)!

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱(chēng)生長(zhǎng)特性發(fā)貨地貨期
小鼠雜交瘤細(xì)胞;IE6-A2特性半貼壁生長(zhǎng)上海3-5天

細(xì)胞名稱(chēng)  小鼠雜交瘤細(xì)胞;IE6-A2特性
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  半貼壁生長(zhǎng)
特征特性   可產(chǎn)生單克隆抗體。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C25
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類(lèi)

來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
α-甘油磷酸二鈉    shēng huà shì jì    容量:        500毫克
α-*(枯草桿菌)    shēng huà shì jì    容量:        5克
α-半乳糖苷酶    shēng huà shì jì    容量:        25克
YNB培養(yǎng)基    shēng huà shì jì    容量:    RT    100轉(zhuǎn)/箱
YM瓊脂    shēng huà shì jì    容量:        25毫升
YM11瓊脂    shēng huà shì jì    容量:    2~8℃    25毫升
YGC瓊脂    shēng huà shì jì    容量:    2~8℃    25毫升
X-SA瓊脂培養(yǎng)基    shēng huà shì jì    容量:    RT    1把/包
XM-G瓊脂培養(yǎng)基    shēng huà shì jì    容量:    RT    1個(gè)
XLT4瓊脂    shēng huà shì jì    容量:        500克小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNMT3B)免疫試劑盒    Mouse DNA(cytosine-5)-methyltransferase 3B,DNMT3B ELISA kit
小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)免疫試劑盒    Mouse DNA(cytosine-5)-methyltransferase 3A,DNMT3A ELISA kit
小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)免疫試劑盒    Mouse DNA(cytosine-5)-methyltransferase 1,DNMT1 ELISA kit
小鼠DAB2互作蛋白(DAB2IP)免疫試劑盒    Mouse Disabled homolog 2-interacting protein,DAB2IP ELISA kit
小鼠C型鈉尿肽(CNP)免疫試劑盒    Mouse C-type natriuretic peptide,CNP ELISA Kit
小鼠C肽(C-Peptide)免疫試劑盒    Mouse C-Peptide ELISA Kit
小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒    Mouse C-Reactive Protein,CRP ELISA Kit
小鼠CXC趨化因受體4(CXCR4)免疫試劑盒    Mouse CXC-chemokine receptor 4,CXCR4 ELISA Kit
小鼠CXC趨化因受體3(CXCR3)免疫試劑盒    Mouse CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 ELISA Kit
小鼠CXC趨化因配體16(CXCL16)免疫試劑盒    Mouse CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISA Kit

 

 


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