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小鼠骨髓雜交瘤細胞株;8A3A10培養

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所  在  地上海

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更新時間:2017-02-08 10:29:07瀏覽次數:150次

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產品簡介

小鼠骨髓雜交瘤細胞株;8A3A10培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  小鼠骨髓雜交瘤細胞株;8A3A10培養
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  懸浮生長
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

產品名稱小鼠骨髓雜交瘤細胞株;8A3A10培養
貨期3-5天
發貨地上海

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
兔子骨膠原交聯/Ⅰ型膠原C端肽(Cr/CTX-Ⅰ)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit Crosslaps,Cr/CTX-Ⅰ ELISA Kit    ,規格:    48T/96T
兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA Kit    Rabbit lipoprotein α,Lp-α ELSIA Kit    Rabbit lipoprotein α,Lp-α ELSIA Kit    Rabbit lipoprotein α,Lp-α ELSIA Kit    Rabbit lipoprotein α,Lp-α ELSIA Kit
兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit    ,規格:    48T/96T
兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit apolipoprotein B100,Apo-B100 ELISA Kit    ,規格:    48T/96T
兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit apolipoprotein A1,Apo-A1 ELISA Kit    ,規格:    48T/96T
兔游離睪酮(F-TESTO)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit free testosterone,F-TESTO ELISA kit    ,規格:    48T/96T
兔乙酰化饑餓激素(aGHRL)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit acylated appetite-regulating hormone,aGHRL ELISA kit    ,規格:    48T/96T
兔乙酰*酯酶(AChE)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit Acetylcholinesterase,ACHE ELISA kit    ,規格:    48T/96T
兔胰淀素(Amylin)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit Amylin ELISA Kit    ,規格:    48T/96T
兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit NOS ELISA Kit    ,規格:    48T/96T
兔血小板選擇素(P-Selectin)ELISA Kit    ,英文名:    rabbit plaet selectin,P-Selectin ELISA Kit    ,規格:    48T/96T
兔血紅素氧合酶1(HMOX1)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit heme oxygenase(decycling)1,HMOX1 ELISA kit    ,規格:    48T/96T
兔心肌特異性肌鈣蛋白T(cTnT)ELISA Kit    ,英文名:    Rabbit cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA Kit    ,規格:    48T/96Todium cromoglycate    *    1KU    USP級,88.5%
Sodium creatine phosphate dibasic tetrahydrate    四水*鹽    100克    CP,99%
Sodium citrate-Hydrochloric acid Buffer solution    檸檬酸鈉鹽酸緩沖液    25克    BR,98%
Sodium citrate dihydrate    *    100克    分析標準品,99%
Sodium chromate tetrahydrate    四水鉻酸二鈉    100克    GR,99.5%
Sodium chromate    鉻酸二鈉    25毫克    4N,99.99%
Sodium chloride    食鹽    50毫克    超純,99%
Sodium carbonate decahydrate    冰堿    250毫克    GR,99.8%
Sodium carbonate anhydrous    碳酸鈉    50毫克    AR,99%
Sodium Caprylate    正辛酸鈉    250毫克    AR,90%

 

 

 


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