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雜交瘤細胞;2H5B12C3使用說明書

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產品型號

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廠商性質代理商

所  在  地上海市

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更新時間:2017-02-08 09:05:03瀏覽次數:218次

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產品簡介

雜交瘤細胞;2H5B12C3使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

產品名稱雜交瘤細胞;2H5B12C3使用說明書
貨期3-5天
發(fā)貨地上海

細胞名稱  雜交瘤細胞;2H5B12C3使用說明書
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C2
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

復蘇操作要點: 
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
茜草的根及根莖Radix Rubiae    Rubiadin    茜根定    117-02-2    C15H10O4    ≥98%
諾麗Morinda citrifolia    Rubianthraquinone    乳癖蒽醌    644967-44-2    C16H12O5    ≥95%
繡球Hydrangea macrophylla    Rubiarbonol B    茜草喬木醇 B    130288-60-7    C30H50O3    ≥98%
馬桑Coriaria nepalensis    Rubifolic acid    全草含茜草萜酸    80489-65-2    C30H48O4    ≥98%
     Rubimaillin    大葉茜草素    55481-88-4    C17H16O4    ≥95%
旱冬瓜Alnus nepalensis    Rubranol    (R)-1,7-雙-(3,4-二羥基苯基)-5-羥基庚烷    211126-61-3    C19H24O5    ≥98%
甜茶RubussuavissimusSLee    Rubusoside  小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP-6)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白4(IGFBP-4)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse Insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4 ELISA kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse IGF-1R ELISA kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠胰島素降解酶(IDE)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse Insulin-degrading Enzyme,IDE ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠*原激活肽(TAP)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠*1(trypsin-1)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse trypsin-1 ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠*(trypsin)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse trypsin ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T

 

 


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