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人肝癌細(xì)胞系；HCCIH03復(fù)蘇

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

人肝癌細(xì)胞系；HCCIH03復(fù)蘇細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

人肝癌細(xì)胞系；HCCIH03復(fù)蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

細(xì)胞名稱 人肝癌細(xì)胞系；HCCIH03復(fù)蘇
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限未定

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
	貼壁生長	上海	3－5天

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
沙氏液體培養(yǎng)基   21091   250g   用于真菌的增菌培養(yǎng)，還用于一次性使用衛(wèi)生用品真菌定性檢測(cè)
胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基   24051   250g   可廣泛應(yīng)用于細(xì)菌的培養(yǎng)，特別用于消毒劑消毒效果的測(cè)試、*的非選擇性增菌培養(yǎng)及蠟...
酪蛋白瓊脂   28370   100g   用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗(yàn) (GB/T4789.28-2003中4.65，GB/T4789.14-2003)。
胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基   28072   250g   用于普通的或營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)，還用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無菌程度的監(jiān)測(cè)及消毒劑消毒效果的...
半固體瓊脂   26050   250g   供細(xì)菌動(dòng)力觀察、菌種保存等用(GB 4789.4－2010和GB/T4789.8－2008)。
乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基   27311   250g   用于維生素檢測(cè)菌種的培養(yǎng)基
中國藍(lán)薔薇酸瓊脂   中國藍(lán)薔薇酸瓊脂   250克
溶脲支原體快速培養(yǎng)基   UU Medium   1人份/1支   BR
溶脲支原體培養(yǎng)基   UU Medium   100毫升   BR
溶脲支原體抗體   UU Antibody   1盒   BR
YT肉湯   YT Broth   250克   BR
YT瓊脂   YT Agar   250克   BR
2×YT肉湯   2×YT Medium Broth   250克   BRCGREF1   細(xì)胞生長調(diào)節(jié)蛋白CGREF1抗體
CHAD   富含*軟骨蛋白抗體
CHADL   軟骨蛋白樣蛋白抗體
CHCHD3   卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD3抗體
CHCHD10   卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD10抗體
CHCHD7   卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD7抗體
CHD1   ATP依賴的解旋酶CHD1抗體
CHD1L   染色質(zhì)解旋酶DNA結(jié)合蛋白抗體
CCHIA   哺乳動(dòng)物酸幾丁質(zhì)酶抗體
CHID1   幾丁質(zhì)酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
Chimaerin 2   嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體