人肝癌細胞；Homo Spaniens cell line Hep B1.2復蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞名稱 人肝癌細胞；Homo Spaniens cell line Hep B1.2復蘇
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C10
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
11302 PYG 液體培養基 250g/瓶 用于雙歧桿菌乙酸和乳酸代謝物測 定，每 100ml 培養基中添加 1 支21301 和 1 支 21319
11303 TPY 液體培養基 250g/瓶 雙歧桿菌 F6PPK 測定
11304 MRS 培養基 250g/瓶 用于乳酸菌平板計數，每 100ml 培 養基中添加 1 支 21302 制成改良 MRS 培養基
11320 含糖牛肉湯培養基 250g/瓶 用于乳酸菌培養和鑒別
11322 含糖牛肉湯瓊脂培養基 250g/瓶 用于乳酸菌計數
11323 LAMVAB 瓊脂基礎 250g/瓶 用于乳酸桿菌的分離，每 100ml 培 養基中添加 1 支 21501
11046 苛養厭氧菌肉湯 250g/瓶 用于厭氧菌的增菌培養，含 0.075%瓊脂
11051 碎肉肉湯基礎 250g/瓶 用于厭氧菌特別是專性厭氧菌的 培養、增菌和修復，含維生素 K， 需添加 11002（庖肉牛肉粒）
11052 碎肉葡萄糖肉湯基礎 250g/瓶 用于厭氧菌特別是專性厭氧菌的 培養、增菌和修復，含維生素 K， 需添加 11002（庖肉牛肉粒）
11053 碎肉碳水化合物肉湯基礎 250g/瓶 用于厭氧菌特別是專性厭氧菌的 培養、增菌和修復，含維生素 K， 需添加 11002（庖肉牛肉粒）
11036 普通啤酒瓊脂培養基 250g/瓶 用于啤酒腐菌、厭氧菌的檢測
11037 改良 NBB 瓊脂基礎 250g/瓶 用于啤酒中厭氧菌的檢測
11043 需氧-厭氧菌瓊脂培養基 250g/瓶 用于滅菌與消毒鑒定試驗
11044 AN 厭氧瓊脂基礎 250g/瓶 厭氧基礎培養基，每 100ml 培養基 中添加 1 支 21004 和 1 支 21005 Survivin 細胞凋亡抑制因子抗體
Clostridium perfringens type D D型產氣莢膜梭菌抗體
Calcitonin 降鈣素抗體
C20orf14 20號染色體開放閱讀框14抗體
CTGF 結締組織生長因子抗體
Cyclin D2 周期素D2抗體
Cyclin E 周期素E抗體
CD94/KLRD1 NK細胞表面抑制受體CD94抗體
CD58 淋巴細胞功能相關抗原-3抗體
CCL27/CTACK 皮膚T細胞虜獲趨化因子抗體
Complement C3 補體C3a過敏毒素抗體
Macrophage Inflammatory Protein 1 gamma 巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體
CD171 神經細胞粘附分子配體1抗體
C8orf30A 8號染色體開放閱讀框30a抗體
