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人類淋巴母細胞瘤細胞;HLCL 9B10使用說明書

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更新時間:2017-01-23 11:21:14瀏覽次數:170次

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產品簡介

人類淋巴母細胞瘤細胞;HLCL 9B10使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  人類淋巴母細胞瘤細胞;HLCL 9B10使用說明書
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  懸浮生長
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

產品名稱人類淋巴母細胞瘤細胞;HLCL 9B10使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
c-Abl    非受體*激酶c-Abl抗體
CCDC152    卷曲螺旋結構域蛋白152抗體
CHPT1    甘油二酯*磷酸轉移酶抗體
Chromogranin B    嗜鉻粒素B抗體
Cullin 5    血管加壓素激活鈣啟動受體蛋白1抗體
Cyp2-j3    細胞色素P450Ⅱj3抗體
CLCA4    鈣激活氯離子通道4抗體
CDK6    周期素依賴激酶6抗體
CDK7    周期素依賴激酶7抗體
CDK8    周期素依賴激酶8抗體
CDKN1C    周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體
Chondrocalcin    Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體
c-fos    c-fos抗體
Chromogranin A    嗜鉻粒素A抗體
CGRP    CGRP降鈣素基因相關肽抗體    12154    酵母氮源基礎(YNB)    250g/瓶    用于通過碳源的利用對酵母菌進 行分類    
    11006    含鐵牛奶培養基    250g/瓶    用于產氣莢膜梭菌暴烈發酵試驗    
    11008    梭菌*    250g/瓶    用于梭菌的增菌培養    
    11014    產芽孢肉湯    250g/瓶    用于產氣莢膜梭菌的芽孢試驗    
    11015    多價蛋白胨-酵母膏(PY)培養基    250g/瓶    用于產氣莢膜梭菌培養    
    11017    乳糖-明膠培養基    250g/瓶    用于產氣莢膜梭菌的乳糖、明膠生 化試驗    
    11020    胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯(TPGYT 基礎)    250g/瓶    用于肉毒梭菌增菌培養,需添加1:250 * 51002    
    11021    厭氧卵黃瓊脂基礎    250g/瓶    用于肉毒梭菌增菌分離,每 100ml培養基中添加 3 支 21001    
    11022    明膠磷酸鹽緩沖液    250g/瓶    用于肉毒梭菌和肉毒毒素檢樣的 制備    
    11023    TSN 瓊脂    250g/瓶    用于產氣莢膜梭菌的選擇性分離 和計數    
    11024    TBB 培養基    250g/瓶    用于乳酪產品中梭菌的計數    
    11027    強化梭菌鑒別瓊脂(DRCA)    250g/瓶    用于食品和其它物質中梭菌的計 數和培養    

 

 

 


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