【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人結腸癌細胞;COLO 394 [COLO394]使用說明書
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C7
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
人結腸癌細胞;COLO 394 [COLO394]使用說明書復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人結腸癌細胞;COLO 394 [COLO394]使用說明書操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
C17orf49 17號染色體開放閱讀框49抗體
C17orf53 17號染色體開放閱讀框53抗體
C17orf57 17號染色體開放閱讀框57抗體
C17orf64 17號染色體開放閱讀框64抗體
C17orf66 17號染色體開放閱讀框66抗體
C17orf74 17號染色體開放閱讀框74抗體
C17orf75 17號染色體開放閱讀框75抗體
C17orf77 17號染色體開放閱讀框77抗體
C17orf78 17號染色體開放閱讀框78抗體
CDT2 維甲酸調節核基質相關蛋白抗體
C17orf42 17號染色體開放閱讀框42抗體
C17orf97 17號染色體開放閱讀框97抗體
CECR1 貓眼綜合征染色體候選基因1抗體
CECR6 貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 11115 1%吐溫 80-玉米瓊脂培養基 250g/瓶 用于白色念珠菌產芽管試驗,每500ml 培養基中添加 1 支 20204
11117 沙氏液體培養基 250g/瓶 用于真菌增菌培養
11118 沙氏瓊脂培養基 250g/瓶 用于真菌計數培養
11119 產毒培養基 1000ml/瓶 用于青霉和曲霉的產毒培養
11120 馬丁培養基 250g/瓶 用于真菌的培養
11122 霉菌培養基 250g/瓶 用于霉菌培養
11123 高鹽察氏培養基 250g/瓶 用于霉菌總數的測定
11126 酵母粉葡萄糖*瓊脂(YGC) 250g/瓶 用 于 霉 菌 酵 母 菌 的 分 離 和 計 數(ISO)
11127 Candida Elective 瓊脂 250g/瓶 用于食品中假絲酵母和酵母菌總 數的測定
11129 DRBC 培養基 250g/瓶 用于食品中霉菌及酵母菌的分離 培養和計數
人結腸癌細胞;COLO 394 [COLO394]使用說明書 11130 Wort 肉湯基礎 250g/瓶 麥芽汁肉湯基礎,用于真菌,特別 是酵母菌的 增菌培養 ,每 100ml 培養基中添加 0.25g21702
11131 Wort 瓊脂基礎 250g/瓶 麥芽汁瓊脂基礎,用于真菌,特別 是酵母菌的計數,每 100ml 培養基 中添加 0.235g21702