細胞名稱 人黑色素瘤細胞；A875培養
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞是一株人黑色素瘤細胞系。可用于建立動物研究模型。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C8
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
10319 氯化鎂孔雀綠增菌液（MM） 250g/瓶 用于沙門氏菌選擇性增菌
10320 亞利桑那菌瓊脂（SA） 250g/瓶 用于亞利桑那菌的分離
10321 WS 瓊脂 250g/瓶 用于沙門氏菌選擇性分離
10322 RVS 肉湯 250g/瓶 用于沙門氏菌選擇性增菌
10323 亮綠酚紅瓊脂 250g/瓶 用于沙門氏菌選擇性分離（GB、ISO、SN）
10325 EF-18 瓊脂基礎 250g/瓶 用 于 沙 門 氏 菌 濾 膜 法 檢 驗 ， 每100ml 培養基中添加 1 支 20321
10356 改良亮綠瓊脂培養基 250g/瓶 用于沙門氏菌選擇性分離
10333 MKTTn 肉湯基礎 250g/瓶 用于沙門氏菌選擇性增菌（ISO）， 每 100ml 培養基中添加 1 套 20315 和新生霉素 4mg
10334 賴氨酸鐵瓊脂（LIA） 250g/瓶 用于沙門氏菌賴氨酸脫梭、脫氨及 硫化氫復合生化試驗（FDA）
10335 改良 MSRV 培養基 250g/瓶 用于沙門氏菌的選擇性分離鑒別， 每 100ml 培養基中需添加 1 支21607
10336 BPL 瓊脂 250g/瓶 用于沙門氏菌的選擇性分離與鑒 別
10337 BPLS 瓊脂 250g/瓶 用于樣本中沙門氏菌的選擇性分 離 COMMD8 銅代謝結構域蛋白8抗體
Chloramphenicol *抗體
C4orf45 4號染色體開放閱讀款
CARD11 凋亡加強結構域蛋白11抗體
Cytochrome B 細胞色素B抗體
COX1 *氧化酶1抗體
CNOT4 細胞表面趨化因子受體4相關蛋白4抗體
CNOT6 細胞表面趨化因子受體4相關蛋白6抗體
CNOT8 細胞表面趨化因子受體4相關蛋白8抗體
Chondroitin Sulfate *抗體
CA50 上皮類癌相關抗原抗體
phospho-CPI17 alpha (Thr38) 磷酸化蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗體
Centromere protein K 著絲粒蛋白K
CTAG1B 腫瘤/抗原1B
Transferrin receptor 轉鐵蛋白受體抗體
