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人羊膜細胞;WISH復蘇

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更新時間:2017-01-19 17:16:57瀏覽次數:238次

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產品簡介

人羊膜細胞;WISH復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

人羊膜細胞;WISH復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  人羊膜細胞;WISH復蘇
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   zui初以為這株細胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLA標記染色體和DNA指紋法分析,它的起源是HeLa細胞污染的。 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。 注意: 這株細胞包含HeLa標記染色體,是從HeLa污染細胞中建株的。 
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優質胎牛血清,10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況  PN
凍存條件   *培養基+8%DMSO
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  B類

產品名稱生長特性發貨地貨期
成纖維細胞樣上海3-5天

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
FAP    英文名稱:    膠質纖維酸蛋白抗體    ?0.1ml
GFP    英文名稱:    綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體)    ?0.2ml
GHR    英文名稱:    生長激素受體抗體    ?0.1ml
Ghrelin    英文名稱:    腦腸肽抗體    ?0.1ml
GPA33    英文名稱:    糖蛋白A33抗體    ?0.2ml
Ghrelin 28    英文名稱:    腦腸肽抗體    ?0.1ml
GLP-2    英文名稱:    胰高血糖素樣肽-2抗體    ?0.1ml
GPR114    英文名稱:    G蛋白偶聯受體GPR114蛋白抗體    ?0.2ml
GDN    英文名稱:    膠質源連接蛋白抗體    ?0.2ml
Glycoprotein VI    英文名稱:    糖蛋白VI/六糖蛋白抗體    ?0.2ml
GMPR1    英文名稱:    鳥苷酸還原酶1抗體    ?0.2ml

 b-FABP(Human brain fatty acid binding protein) ELISA Kit  人腦型脂肪酸結合蛋白    Multi-class antibodies    規格:     96T
BK(Human Bradykinin) ELISA Kit  人血管舒緩激肽    Multi-class antibodies    規格:     48T
MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit  人肌球蛋白輕鏈    Multi-class antibodies    規格:     48T
ACTN-3(Human Alpha-Actinin 3) ELISA Kit  人α-輔肌動蛋白3    Multi-class antibodies    規格:     48T
hs-CRP(Human high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit  人超敏C反應蛋白    Multi-class antibodies    規格:     48T
Tn- I (Human Troponin I ) ELISA Kit  人肌鈣蛋白Ⅰ    Multi-class antibodies    規格:     48T
SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit  人血清淀粉樣蛋白A    Multi-class antibodies    規格:     48T
Hsp-60(Human Heat Shock Protein 60) ELISA Kit  人熱休克蛋白60    Multi-class antibodies    規格:     48T
HSP gp96(Human Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit  人熱休克蛋白糖蛋白96    Multi-class antibodies    規格:     48T
CT-1(Human cardiotrophln 1) ELISA Kit  人心肌營養素1    Multi-class antibodies    規格:     48T
CP/CER(Human Ceruloplasmin) ELISA Kit  人銅藍蛋白    Multi-class antibodies    規格:     48T
HSP-90(Human Heat Shock Protein 90) ELISA Kit  人熱休克蛋白90    Multi-class antibodies    規格:     48T
HSP-70(Human Heat Shock Protein 70) ELISA Kit  人熱休克蛋白70    Multi-class antibodies    規格:     48T

 

 


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