氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長(zhǎng)抑制因子1(OSGIN1)ELISA試劑盒操作總結(jié)
本試劑盒僅供研究使用。
檢測(cè)范圍：96T10ng/L-245ng/L
使用目的：
本試劑盒用于測(cè)定兔血清、血漿、尿液及相關(guān)液體樣本中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)水平。用純化的兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)，再與HRP標(biāo)記的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)濃度。
試劑盒組成
130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶
2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（480ng/L）0.5ml×1瓶
3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶
4樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書1份
5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張
6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
240ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
120ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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