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經(jīng)營(yíng)模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:9956條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:王先生 (經(jīng)理)

公司動(dòng)態(tài)

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23試劑盒操作注意事項(xiàng)

閱讀:278發(fā)布時(shí)間:2019-3-5

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23試劑盒

操作步驟:

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;混勻后從第五孔、第六孔中各取50μl分別加到第七孔、第八孔中價(jià)格,再在第七孔、第八孔中分別取50μl加到第九孔、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后隔空加樣量都為50μl,濃度分別為1200ng/L,800ng/L,400ng/L,200ng/L,100ng/L。)

2.加樣:分別在設(shè)空白(空白對(duì)照孔不加樣品幾酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)養(yǎng)品孔。在酶標(biāo)包被樣板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40ng/L,然后再加待測(cè)樣品10ng/L(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。重復(fù)50次,拍干。

5.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

6.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。

7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立傳黃色)。

8.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行

注意事項(xiàng):

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中去除應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,西施是可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果


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