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對西馬特羅雜交瘤細胞株的建立及其單克隆抗體制備和鑒定的實驗研究

閱讀:300發布時間:2019-1-28

西馬特羅檢測試劑盒  用重氮化法將牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分別與西馬特羅(CIM)偶聯作為免疫原或包被原,

用BSA-CIM免疫BALB/c小鼠,經過3次免疫后,OVA-CIM包被后用間接ELISA和阻斷ELISA選擇細胞融合備用鼠,選擇價、高敏感性和高特異性的小鼠進行抗原*免疫;

取脾細胞應用雜交瘤技術與骨髓瘤細胞建立分泌CIM單克隆抗體(Monoclonal antibody,mAb)的雜交瘤細胞株;用體內誘生腹水法制備CIM mAb,對CIM mAb的效價、敏感性和特異性等免疫學特性進行鑒定。

結果顯示免疫的6只小鼠血清抗體效價均達到10-3;融合后篩選出3B11-H4、2A11-G11和4F5-F11共3株敏感特異的雜交瘤細胞,其細胞培養上清液效價分別為1∶800、1∶1600和1∶1600,腹水效價分別為1∶2.56×106、1∶1.02×107和1∶2.56×107,3B11-H4株對CIM的IC50為0.40ng/ml,與瘦肉精、萊克多巴胺等其他β2激動劑交叉反應性小于0.2%。本試驗獲得了價、敏感、特異的抗CIM mAb,為CIM殘留ELISA檢測試劑盒和試紙條的建立奠定了堅實的基礎。

西馬特羅檢測試劑盒  


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