大鼠ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)前需要做足功課還要準(zhǔn)備許多樣本，如血清、血漿，尿液、細(xì)胞培養(yǎng)基、上清等。前期的準(zhǔn)備固然重要，但是后期的步驟才是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵，所以在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的每步都需要實(shí)驗(yàn)人員有足夠的用心和耐心。關(guān)于大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中溫育的步驟您又了解多少呢？一起來(lái)競(jìng)答吧！
大鼠ELISA試劑盒保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過(guò)程稱為溫育（incubation），有人稱之為孵育（在ELISA中似乎并不恰當(dāng)。）
ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度，也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。ELISA試劑盒在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí)，實(shí)驗(yàn)表明，兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí)，產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng)，可提高反應(yīng)的溫度，有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行，但不宜采用更高的溫度?？乖贵w反應(yīng)4℃更為*，在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中存放隔夜，以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng)，在ELISA中一般不予采用。
您的大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中溫育是否也是如此呢，如果不是的話就需要注意嘍，如果是的話那就證明您的實(shí)驗(yàn)溫育步驟很正確，請(qǐng)繼續(xù)保持。
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