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elisa酶聯免疫試劑盒雙抗原夾心法測抗體

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elisa酶聯免疫試劑盒雙抗原夾心法測抗體
反應模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結合物,以檢測相應的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關鍵在于酶標抗原的制備,應根據抗原結構的不同,尋找合適的標記方法。
雙位點一步法
在雙抗體夾心法測定抗原時,如應用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,則在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步并作一步。這種雙位點一步不但簡化了操作,縮短了反應時間,如應用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也顯著提高。單克隆抗體的應用使測定抗原的ELISA提高到新水平。
在一步法測定中,應注意鉤狀效應(hookeffect),類同于沉淀反應中抗原過剩的后帶現象。當標本中待測抗原濃度相當高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合,而不再形成夾心復合物,所得結果將低于實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果。
間接法測抗體
間接法間接法是檢測抗體zui常用的方法,其原理為利用酶標記的抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:
⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。
⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他抗體及血清中的雜質由于不能與固相抗原結合,在洗滌過程中被洗去。
⑶加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結合,從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標羊抗人IgG抗體。
⑷加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。間接法的優點是只要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應抗體的方法。
 elisa酶聯免疫試劑盒VA     人維生素A     規格:    48T/96T
 MTF     人微量轉鐵蛋白     規格:    48T/96T
 MAP-2     人微管相關蛋白2     規格:    48T/96T
 MAP-2     人微管相關蛋白2     規格:    48T/96T
 omentin     人網膜素     規格:    48T/96T
 AOPP     人晚期氧化蛋白產物     規格:    48T/96T
 RAGE/AGER     人晚期糖基化終末產物受體     規格:    48T/96T
 AGEs     人晚期糖基化終末產物     規格:    48T/96T
 extein     人外顯肽     規格:    48T/96T
 SA     人唾液酸     規格:    48T/96T
 DUTP     人脫氧尿三磷酸     規格:    48T/96T
 DPD     人脫氧膠原吡啶交聯     規格:    48T/96T
 DNase-Ⅰ     人脫氧核糖核酸酶Ⅰ     規格:    48T/96T
 DPD     人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉     規格:    48T/96T
 DHEA-S     人脫氫表雄酮硫酸酯     規格:    48T/96T
 MT     人褪黑素     規格:    48T/96T
 HAase     人透明質酸酶     規格:    48T/96T
 HABP     人透明質酸結合蛋白     規格:    48T/96T
 HA     人透明質酸     規格:    48T/96T
 CP/CER     人銅藍蛋白     規格:    48T/96T
 HOXB2     人同源框B2     規格:    48T/96T
 GTC     人通用轉錄復合體     規格:    48T/96T
 FE     人鐵蛋白     規格:    48T/96T
 AZU     人天青殺素     規格:    48T/96T
 GOT/GPT     人天門冬氨酸轉氨酶/谷草轉氨酶     規格:    48T/96T
 AST     人天門冬氨酸氨基轉移酶     規格:    48T/96T
 SMAF     人特異性巨噬細胞武裝因子     規格:    48T/96T
 iNV     人套膜蛋白     規格:    48T/96T
 iNV     人套膜蛋白     規格:    48T/96T
 GP-MM     人糖原磷酸化酶同工酶MM     規格:    48T/96T
 GP-II     人糖原磷酸化酶同工酶II     規格:    48T/96T
 GP-BB     人糖原磷酸化酶同工酶BB     規格:    48T/96T
 GSK     人糖原合成酶激酶     規格:    48T/96T
 CDT     人糖缺失性轉鐵蛋白     規格:    48T/96T
 GR     人糖皮質類固醇受體     規格:    48T/96T
 GPI     人糖磷脂酰肌醇     規格:    48T/96T
 CA19-9     人糖鏈抗原19-9     規格:    48T/96Telisa酶聯免疫試劑盒

 

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