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ELISA試劑盒的抗體與檢測抗體

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ELISA試劑盒的抗體與檢測抗體

    如今檢測ELISA試劑盒有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般ELISA試劑盒檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP),而反應體系中添加有相應的底物(如3,3-二氨基聯苯胺DAB)。

    這種酶促反應生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標記的酶與親和素標記的一抗結合。如今檢測ELISA試劑盒有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般ELISA試劑盒檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP),而反應體系中添加有相應的底物(如3,3-二氨基聯苯胺DAB)。

    這種酶促反應生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標記的酶與親和素標記的一抗結合。雙抗夾心法ELISA試劑盒中捕獲抗體與檢測抗體(不論多抗還是單抗)的配對很有講究。我們不希望捕獲競爭抗原上的同一位點,為此我們就需要確保捕獲抗體和檢測抗體所識別的抗原表位不存在重疊。如果捕獲抗體和檢測抗體之間發生了沖突,就會對實驗結果產生較大影響。  ELISA試劑盒有多種類型,不過它們都有一個共同特點,就是進行抗原捕獲。

    一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進行捕獲。In-cellELISA試劑盒和酶聯免疫斑點ELISPOT是兩種特殊的類型,In-cellELISA試劑盒需要將微孔板中培養的細胞進行固定和通透化,然后再用抗體原位檢測。ELISPOT有點像蛋白印跡Western blot,先在帶膜的微孔板中培養細胞,然后在膜上檢測細胞分泌的抗原形成斑點。此外,我們還需要根據自身需要選擇96孔板或是48孔板進行ELISA試劑盒實驗。

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