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154次 大鼠白血病抑制因子ELISA試劑盒加入一抗二抗需要放入37°C,如果同時做多個板子,多個板子別羅一起;盡量少用排槍;加樣時,由低濃度向高濃度加,這樣減少跳孔的幾率;勤換槍頭。還有細節,需要自己再發掘。精密度:批內精密度(內檢測精度):CV%<8%
三個已知濃度的樣品在一個平板上測試了20次評估。
間精密度(精密檢測間):CV%<10%
已知的三個樣本20檢測濃度進行了測試評估。ELISA常用結果判定的方法
1)定性測定
(1)陽性判定值法(cut-off value,CO值):一般為陰性對照的平均A值加一個常數,試劑制備嚴格標準化,要先計算出陽性對照A值平均數和陰性對照A值平均數。標本A值≥CO值即為陽性。
(2)抑制率法:在競爭抑制法中結果可用抑制率表示。
抑制率(%)=(A陰性對照A- A待測)/陰性對照X100%,一般以抑制率≥50%為陽性
2)半定量測定:結果一般以滴度表示。將標本連續稀釋后,進行ELISA檢測,在陽性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標本的“滴度”。
3)定量測定:即用己知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,與待測標本同時進行測定,繪制標準曲線,結果以量或活性單位表示之。
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