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凍存細胞培養操作步驟：
(1) 將一管細胞從液氮罐中取出，注意保護手和眼睛。
(2) 將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并旋轉，直到管內物體*融化。
(3) 將凍存管立即從水浴中拿出，擦干，轉入無菌環境。
(4) 用70％的酒精沖洗凍存管，然后擦去多余酒精。
(5) 打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋（注意，由于凍存管有負壓，開蓋時可能會有少量溢出，這是正常現象）。
(6) 用多聚賴氨酸（或參照說明書）包被培養瓶。多數細胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細胞。
(7) 蓋好培養瓶的蓋子，輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
(8) 將培養瓶放入培養箱中（37℃，5%CO2，95%空氣）
(9) 放入培養箱后第6-16小時更換一次培養基，以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。
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