科研抗體 單克隆抗體在檢測中的應(yīng)用
１暢單克隆抗體在熒光染色技術(shù)中的應(yīng)用 不同細(xì)胞表達(dá)不同的表面標(biāo)志，同一種細(xì)胞在不同時期也 可表達(dá)不同的標(biāo)志。以熒光素標(biāo)記單克隆抗體并采用熒光流式細(xì)胞儀（ＦＡＣＳ）技術(shù)是檢測和分析細(xì)胞表 面標(biāo)志、分離不同細(xì)胞亞群zui、zui簡捷的實(shí)驗(yàn)方法。如果采用ＦＩＴＣ、ＰＥ、ＰｅｒＣＰ 等多色熒光標(biāo)記，可對 細(xì)胞進(jìn)行雙色染色或多色染色。*的ＣＤ 系列單克隆抗體已達(dá)２００ 多種，通過計數(shù)帶有不同ＣＤ 標(biāo) 志的細(xì)胞數(shù)，可了解血細(xì)胞及其亞群變化，可鑒定血細(xì)胞性疾病。
熒光素標(biāo)記的單克隆抗體還可用于對生物活性分子細(xì)胞內(nèi)示蹤。核轉(zhuǎn)錄因子ＮＦ －κＢ 在非轉(zhuǎn)錄狀態(tài) 時位于胞質(zhì)內(nèi)，當(dāng)激活時可進(jìn)入細(xì)胞核，調(diào)節(jié)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。采用熒光標(biāo)記的特異性抗體可對ＮＦ －κＢ 進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)定位，從而了解細(xì)胞的狀態(tài)。抑癌基因表達(dá)的ｐ５３ 蛋白與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)及細(xì)胞凋亡有關(guān)，通常 其在細(xì)胞內(nèi)的半衰期很短，常規(guī)方法難以檢測。當(dāng)發(fā)生突變時，則半衰期延長，引起在細(xì)胞內(nèi)聚集，采用熒 光標(biāo)記的特異性抗體，可檢測細(xì)胞內(nèi)ｐ５３ 蛋白聚集狀況。
２暢單克隆抗體在放射免疫分析中的應(yīng)用 １９５９ 年，Ｙａｌｏｗ 等建立的放射免疫分析法（ＲＩＡ），是超微量 分析*的一次突破。其原理是用放射性核素標(biāo)記抗原（圖２２ －５），與被測抗原競爭相應(yīng)的抗體，核素標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物越多，則被測抗原越少，反之亦然。ＭｃＡｂ 問 世以來，因其可大批量生產(chǎn)，并且具有高度特異性和均一性，使放射 免疫檢測的實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確度更高，重復(fù)性更好。在研究激素與內(nèi)分 泌疾病的關(guān)系、診斷內(nèi)分泌疾病及評判治療效果等方面具有重要意 義。
單克隆抗體還應(yīng)用于興奮劑檢測之中，如區(qū)分人體內(nèi)的內(nèi)源性 促紅細(xì)胞生成素（ＥＰＯ）和攝入性ＥＰＯ，必須采用高特異性的單克隆 抗體予以鑒別。
３暢單克隆抗體在酶免疫分析中的應(yīng)用 細(xì)胞因子在免疫調(diào)節(jié)過程中扮演重要角色，由辣根過氧化物 酶標(biāo)記的抗細(xì)胞因子單克隆抗體等試劑所建立的夾心ＥＬＩＳＡ 方法，可檢測人體體液中絕大部分微量存在 的細(xì)胞因子，對評價細(xì)胞因子參與免疫調(diào)節(jié)和免疫病理過程具有重要意義。ＭｃＡｂ 還能用于微生物的鑒 別，應(yīng)用ＭｃＡｂ 不僅能鑒別不同的病原體，還能鑒別相同病原體不同的種、型、亞型以及不同生活周期的抗 原性變化。流感病毒經(jīng)常發(fā)生變異，由此引起反復(fù)流行。單克隆抗體可分辨流感病毒微小變異，對流感快 速診斷，流行預(yù)測和疫苗的制備具有重要意義。
３暢單克隆抗體在酶免疫分析中的應(yīng)用 細(xì)胞因子在免疫調(diào)節(jié)過程中扮演重要角色，由辣根過氧化物 酶標(biāo)記的抗細(xì)胞因子單克隆抗體等試劑所建立的夾心ＥＬＩＳＡ 方法，可檢測人體體液中絕大部分微量存在 的細(xì)胞因子，對評價細(xì)胞因子參與免疫調(diào)節(jié)和免疫病理過程具有重要意義。ＭｃＡｂ 還能用于微生物的鑒 別，應(yīng)用ＭｃＡｂ 不僅能鑒別不同的病原體，還能鑒別相同病原體不同的種、型、亞型以及不同生活周期的抗 原性變化。流感病毒經(jīng)常發(fā)生變異，由此引起反復(fù)流行。單克隆抗體可分辨流感病毒微小變異，對流感快 速診斷，流行預(yù)測和疫苗的制備具有重要意義。
４暢單克隆抗體在定位檢測中的應(yīng)用 放射性核素９９ｍ Ｔｃ 等標(biāo)記單克隆抗體，通過靜脈、腹腔或腰椎穿 刺等方式進(jìn)入機(jī)體后，可特異性地與靶抗原結(jié)合，顯示抗原分子和組織細(xì)胞的機(jī)能狀態(tài)。這種檢測方法稱 為功能顯像，又稱為放射免疫顯像（ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｉｍａｇｉｎｇ，ＲⅡ）。ＲⅡ可進(jìn)行腫瘤的分類和鑒別診斷，可確 定腫瘤的原發(fā)病灶及轉(zhuǎn)移部位，并可確定腫瘤大小。ＲⅡ還可用于心肌壞死病灶的定位測定、血栓的定位 測定以及炎癥病灶的探測。
４暢單克隆抗體在定位檢測中的應(yīng)用 放射性核素９９ｍ Ｔｃ 等標(biāo)記單克隆抗體，通過靜脈、腹腔或腰椎穿 刺等方式進(jìn)入機(jī)體后，可特異性地與靶抗原結(jié)合，顯示抗原分子和組織細(xì)胞的機(jī)能狀態(tài)。這種檢測方法稱 為功能顯像，又稱為放射免疫顯像（ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｉｍａｇｉｎｇ，ＲⅡ）。ＲⅡ可進(jìn)行腫瘤的分類和鑒別診斷，可確 定腫瘤的原發(fā)病灶及轉(zhuǎn)移部位，并可確定腫瘤大小。ＲⅡ還可用于心肌壞死病灶的定位測定、血栓的定位 測定以及炎癥病灶的探測。
