細(xì)胞：NRK-52E細(xì)胞

中文名稱(chēng)：大鼠腎小管上皮細(xì)胞

生長(zhǎng)特性：貼壁細(xì)胞

培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（ 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作）

1． 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min）

2． 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消化到細(xì)胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。

3． 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4． 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。

（網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，以細(xì)胞庫(kù)管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢(xún)細(xì)胞庫(kù)管理員，避免不必要的損失；）

干細(xì)胞培育環(huán)境影響干細(xì)胞分化

在紫外光照射下，這種凝膠會(huì)軟化，這使得研究能夠改變底物的硬度，且無(wú)需分離及轉(zhuǎn)移細(xì)胞至新環(huán)境。發(fā)現(xiàn)細(xì)胞在硬底物上培養(yǎng)一天然后恢復(fù)至軟表面培養(yǎng)后，RUNX2會(huì)“失活"從細(xì)胞核重定位到細(xì)胞質(zhì)。

（人MDA-MB-435S細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人乳癌細(xì)胞）

然而如果細(xì)胞在硬底物上培養(yǎng)10天再轉(zhuǎn)換為軟底物，之后的10天時(shí)間里RUNX2仍在細(xì)胞核中活化。當(dāng)檢測(cè)YAP激活時(shí)看到了相似的結(jié)果。在硬底物上度過(guò)的時(shí)間越長(zhǎng)，細(xì)胞于軟表面培養(yǎng)時(shí)YAP活化的時(shí)間也相應(yīng)延長(zhǎng)。

（人M14細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人黑色素瘤細(xì)胞）

研究結(jié)果還具有實(shí)用意義。如果一種體外培養(yǎng)過(guò)程能夠無(wú)意中誘導(dǎo)細(xì)胞某方面活化……它們有可能不會(huì)像研究人員所猜測(cè)的那樣運(yùn)轉(zhuǎn)。這無(wú)疑增加了我們關(guān)于體外應(yīng)該如何培養(yǎng)干細(xì)胞的認(rèn)識(shí)。

（人M4A4細(xì)胞 來(lái)源：通派細(xì)胞庫(kù) 人乳癌細(xì)胞）

RUNX2、YAP以及其他的一些改變與細(xì)胞在硬材料上度過(guò)的時(shí)間相關(guān)，但這樣的關(guān)聯(lián)未必確定證實(shí)了這些改變的原因。