一、探針的類型
核酸分子探針是指用放射性核素或其他標記物標記的、能與特定的靶分子發生特異性相互作用的DNA或RNA片段。
1． 基因組DNA探針：病毒DNA等
2． cDNA探針；zui常用
3． 寡核苷酸探針：10-50bp，測序、點突變
4． RNA探針：穩定性高、特異性強，但RNA極易降解，不宜操作。

二、探針的標記物

理想的標記物：敏感度高；特異性強；不影響探針分子的主要理化特性；標記、檢測方法簡單、探針保存時間長；對環境無污染、對人體無損害；價格低廉。
一）放射性標記物
二）非放射性標記物

（一） 放射性標記物——放射性核素
利用放射性核素能產生射線的特性將核素標記在核酸合成所必需的NTP或dNTP上，通過一定方法摻入到DNA 或RNA 中去制成探針，與待測的核酸雜交后，核素產生的?或?射線可使底片感光的特性，通過放射自顯影的方法進行檢測。
產生?射線的核素：32P、3H、35S
產生?射線的核素：125I
1、常用的放射性核素
1） 32P：產生?射線，靈敏度高，分辨率強，是zui常用的放射性標記物，但半衰期短（14。3天）：?位和?位標記。
2）35S：分辨率高、半衰期長（87.1天）。敏感度底

2、放射性標記物的優缺點

優點：靈敏度高：0.01pg
特異性強
缺點：放射性污染
成本高、半衰期短，不能長期保存

二）非放射性標記物
1、優缺點
優點：無放射性污染，成本低、操作簡單
缺點：敏感性、特異性均低于放射性核素

2、常用的標記物
1）生物素：1-2pg
生物素化核苷酸：bio-16-dUTP
bio-11-dUTP
生物素化核苷酸----通過酶觸反應摻入到DNA中去制成探針----雜交----抗生物素蛋白-生物素-酶的復合物—加底物—顯色
光敏生物素：生物素與光敏基團結合----光敏生物素-----光敏生物素與核酸探針混合----在強光的作用下----光敏基團與核酸共價結合---生物素標記的 探針

生物素化的核苷酸和光敏生物素