蛋白質(zhì)系列
CAT#:RS990613-25
CAT#:RS990613-100
低溫運(yùn)輸、4℃保存
細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒
Nuclear Protein Miniprep Kit
使用手冊V1.0
產(chǎn)品及特
點(diǎn)
DNA 只存在于細(xì)胞核內(nèi)，因此參與轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和DNA 復(fù)制的蛋白質(zhì)主要存在于細(xì)
胞核中，要研究蛋白質(zhì)與DNA 的相互作用，首先需要制備能夠與DNA 作用的天然細(xì)
胞核蛋白質(zhì)。目前、細(xì)胞核蛋白質(zhì)制備方法一般都比較繁瑣，一次處理大量樣品時
尤其不便，為此本公司開發(fā)了本產(chǎn)品，用于從哺乳動物組織和培養(yǎng)細(xì)胞核蛋白的微
量提取，它具有下列特點(diǎn)：
1. 提取制備過程簡便，只需要一小時。
2. 實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，尤其適合同時處理多個樣品。
3. 可用于培養(yǎng)的動物細(xì)胞，也可以用于組織細(xì)胞。
4. 制備的核蛋白能保持天然活性，可以直接用于轉(zhuǎn)錄因子活性分析、凝膠阻滯實(shí)
驗(yàn)(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA 足跡圖實(shí)驗(yàn)和甲
基化干擾實(shí)驗(yàn)酶活性測定等研究。
規(guī)格及成
分
成份25 次包裝100 次包裝
溶液A 10 mL 40 mL
溶液B 2.5 mL 10 mL
使用手冊1 份1 份
運(yùn)輸及保
存
低溫運(yùn)輸、4℃保存，有效期一年。
自備試劑無
使用方法1、對培養(yǎng)細(xì)胞：將覆蓋率為55-65%的培養(yǎng)細(xì)胞用自備的*溶液（天澤產(chǎn)品編
號：90306）按標(biāo)準(zhǔn)的*法處理，然后刮到1.5mL 塑料離心管中，室溫離心
30 秒，小心棄上清。
2、對懸浮細(xì)胞：直接將5×105-7 個的懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移到1.5mL 塑料離心管中，室溫
離心30 秒，小心棄上清。
3、用1.5 mL 自備的PBS 緩沖液洗滌細(xì)胞沉淀一次，然后室溫離心后棄上清。
4、在細(xì)胞沉淀中加入400 uL 溶液A，用手指彈管壁使沉淀懸浮起來。
5、冰浴10 分鐘，渦旋激烈震蕩10 秒混勻。
6、室溫離心10 秒種，小心棄上清。
7、在沉淀中加入100 μL 溶液B，輕輕混勻使沉淀懸浮起來。
8、冰浴20 分鐘。
9、4℃離心2 分鐘，小心收集上清液（細(xì)胞核提取物），可立即用于后續(xù)的凝膠滯
后實(shí)驗(yàn)、BCA 法蛋白濃度測定或活性檢測等實(shí)驗(yàn)，也可以分裝后放-70℃長期保
存。
說明：本方法可以從1×106 的細(xì)胞中得到50-70ug 的核蛋白質(zhì)。
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